細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

U-138 MG人神經(jīng)星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤

商品屬性

商品介紹

種屬來源：人

性別年齡：男性，47歲

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：多角型

細(xì)胞規(guī)格：1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件：EMEM + 10% fetal bovine serum (FBS)37 ℃, 5% CO2

凍存條件：90% FBS + 10% DMSO

傳代方法：1：4到1：8傳代，2-3天傳1代

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

上皮細(xì)胞粘附分子(EPCAM)重組蛋白 Recombinant Epithelial Cell Adhesion Molecule (EPCAM)

GFRA2 Protein Human 重組人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白

ESAM重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 Protein

NA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性)

IL5重組人 IL5 / Interleukin 5 蛋白 Protein

ESAM重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 Protein

上皮細(xì)胞粘附分子(EPCAM)重組蛋白 Recombinant Epithelial Cell Adhesion Molecule (EPCAM)

IL5重組人 IL5 / Interleukin 5 蛋白 Protein

GFRA2 Protein Human 重組人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白

NA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性)

小鼠白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit 人脫氫表雄酮酯(DHEA-S)檢測(cè)試劑盒

Humanglucokinase,GCKELISAKit 人葡萄糖激酶(GCK)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCampylobacterJejuniPEB1檢測(cè)試劑盒人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達(dá)細(xì)胞篩選試劑盒(HAT+潮霉素)10次(10毫升：10倍濃縮)

HumansolublehumanleucocyteaigenG1,sHLA-GELISAKit人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

U-138 MG人神經(jīng)星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠Ghrelin受體(Ghsr)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： Ghsr ELISA Kit

Mouse calcium binding protein (CR) ELISA Kit 小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1(mouse AIL R1)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforICAM-2/CD102ELISAKit大鼠細(xì)胞間粘附分子2

通用型水稻白葉枯病野油菜假單孢菌水稻變種(Xahomonascampesispv.oryzae;Xco)試劑盒20次

ELISAKitMBP大鼠髓0脂堿性蛋白