NCI-H1299(人非小細胞肺癌細胞)

本公司所有產品僅供科學實驗，不做其他科學實驗外的使用！

商品詳情：

別稱 H1299; H-1299; NCIH1299

種屬 人類

年齡（性別） 男性，43歲

組織來源 肺癌：非小細胞肺癌；轉移灶：淋巴結

生長特性 貼壁細胞

細胞形態 上皮細胞樣

背景描述：NCI-H1299細胞來源于一個淋巴結轉移，患者接受了初期放療。NCI-H1299細胞均一性的部分缺失p53蛋白，并缺少p53蛋白表達。NCI-H1299細胞可以合成0.1pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液釋放肽(GRP)。

生物安全等級 1

生長培養基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~30小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

基因表達情況 These cells stain positive for keratin and vimentin but are negative for neurofilament triplet protein. neuromedin B, The cells have a homozygous partial deletion of the p53 protein, and lack expression of p53 protein. The cells produce neuromedin B.

細胞培養操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養基，培養過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 -3min（視細胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。

c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。

3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。

b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細胞培養注意事項 ：

一、 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象 發生請及時和我們聯系。

二、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由 客戶自行承擔。

三、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。

四、貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養基重懸 細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

五、 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

六、 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細胞僅供科研使用。

八、備注：運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產品：

大鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira IgG)檢測試劑盒 ，英文名： Leptospira IgG ELISA Kit

Porcine ierleukin 10 (IL-10) ELISA Kit 豬白介素10(IL-10)檢測試劑盒

甲型副氏菌(SPA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIC-1humanELISAkit人巨噬細胞抑制因子-1檢測試劑盒

體液鎂離子(Mg)濃度化學比色法定量檢測試劑盒50次

ELISAKitSAA牛血清淀粉樣蛋白A

CSRP1重組小鼠 CSRP1 / CSRP / CRP1 蛋白 Protein

酶Ⅱ(CA2)天然蛋白 Native Carbonic Anhydrase II (CA2)

CFHR2重組人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白 Protein

CD160 Protein Human 重組人 CD160 蛋白

MDH1 Protein Rat 重組大鼠 MDHA / MDH1 蛋白

RAD23同源物B(RAD23B)重組蛋白 Recombinant RAD23 Homolog B (RAD23B)

CD160 Protein Human 重組人 CD160 蛋白

TNFRSF4重組小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CX3CL1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標簽)

GMFB重組人 GMFB 蛋白 Protein

NCI-H1299(人非小細胞肺癌細胞)小鼠胰島細胞抗體(ICA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human leptin soluble receptor (sLR) ELISA Kit 人可溶性瘦素受體(sLR)檢測試劑盒

HumanComplemefragme3b,C3bELISAKit 人補體片斷3b(C3b)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor3-(Human3-Niotyrosine)ELISAKit人3-硝基酪

飲料(CO2)濃度酶偶聯反應比色法定量檢測試劑盒20次

MouselymphocytefactorELISAKit小鼠淋巴細胞因子檢測試劑盒規格：96T/48T

心脂肪酸結合蛋白   英文名稱：   hea fatty acid-binding protein   規格：      英文縮寫：   H-FABP

可溶性白細胞抗原G   英文名稱：   soluble leukocyte aigen G   規格：      英文縮寫：   sHLA-G

富組酸糖蛋白   英文名稱：   rich in histidine glycoprotein   規格：      英文縮寫：   HPRG

血液結合素   英文名稱：   Hemopexin   規格：      英文縮寫：   HPX